1、蜘蛛通过交配繁殖。在交配前,雄蛛织一精网,从生殖孔产一滴含精子的液体到精网上,然后把精子吸入触肢器内。有的在交配时有求偶动作,如狼蛛和跳蛛挥动其须肢。多数雄蛛在交配时用左须肢插入雌蛛生殖板上的左侧开孔,右肢插入右侧孔。精子入生殖板后,移入与输卵管相通的受精囊,卵通过输卵管至生殖孔排出的过程中即受精。
2、有的雄蛛于交配后将交接器再充以精液,并与同一雌蛛再次交配。交配后,有些种类的雄蛛在雌蛛生殖板上涂一种分泌物(生殖栓),阻止雌蛛再交配。有的雄蛛在交配后为雌蛛所食,但这种情况不常见。黑寡妇雄蛛交配后数日死亡,偶因交配后太衰弱被雌蛛捕食。
3、产卵前,雌蛛先纺丝做“产褥”,产出卵,以贮存的精子使卵受精,再在卵块上纺一层丝。把两层丝膜的边连在一起,通常再用一层丝整个包起来,形成一个卵袋。每只雌蛛产卵袋1~15个不等,每个卵袋内含卵少则几个,最多达3000个,多数是几十个。卵袋附在网上(结网蜘蛛),或产在石下、叶面上。有的母蛛守护卵袋,如蟹蛛爬伏在卵袋上,遇到危险也不离开。
4、也有随身携带卵袋的,狼蛛带在腹部后端的纺器上,幽灵蛛科用螯肢衔在口端,盗蛛衔住后放在胸板下方。孵出卵壳的幼蛛仍在卵袋内停留数天,并在袋内蜕1~2次皮。狼蛛的幼蛛离开卵袋后,均爬到母蛛腹部的背面,由母蛛带着游猎数天后,才独立生活。幼蛛在成熟前共蜕皮4~15次。蜘蛛的世代可多达1年6代,也有的1年1代,少数种类为数年1代。寿命一般为几个月到1至2年,少数有长达20至30年的。
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