化学性质实验报告
有机实验报告
糖、氨基酸和蛋白质的鉴定
一、糖的鉴定
糖类化合物:又称碳水化合物,是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称,一般由碳、氢与氧三种元素所组成。
实验目的:
(1)进一步了解糖的化学性质; (2)掌握鉴定糖的方法及其原理。
(一)-萘酚试验(molish)糖类化合物一个比较普遍的定性反应是molish反应。即在浓硫酸存在下,糖与-萘酚(molish试剂)作用生成紫色环。
实验方法
取3支试管,编号,分别加入0.5 ml 0.5%的各待测糖水溶液,滴入2滴molish试剂( -萘酚的乙醇溶液),摇匀。把试管倾斜450,沿管壁慢慢加入约1ml浓硫酸(切勿摇
动),小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。硫酸在下层,试液在上层 样品:葡萄糖、蔗糖及淀粉
解释:
糖被浓硫酸脱水生成糠醛或糠醛衍生物,后者进一步与
-萘酚缩合生成紫红色
物质,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫色环。
(二) fehling试验
(1)实验原理
fehling试剂:含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。
硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀,fehling试剂中需加入酒石酸钾钠,它与cu2+形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离 子。
(2)操作方法
取4支试管,编号,分别加入fehling试剂i和ii 各0.5ml。摇匀并置于水浴中微热后,分别加入5滴待测糖溶液,振荡后置于沸水浴中加热2 ~ 3min,取出冷却,观察颜色变化及 有无沉淀析出。fehling试剂 i:称取3.5 g硫酸铜溶于100 ml蒸馏水中, 得淡蓝色的 fehling试剂 i。
fehling试剂 ii:将17g酒石酸钾钠溶于20ml热水中,然后加入20 ml含
5 g naoh的水溶液,稀释至100 ml得无色透明的
fehling试剂 ii。
样品:葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖
解释: 硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的.氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产 生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。
(三) benedict试验
(1)实验原理:benedict试剂是fehling试剂的改良。benedict试剂利用柠檬酸作为 cu2+的络合剂。
benedict试剂: 取17.3 g柠檬酸钠和10 g 无水碳酸钠溶于80 ml水中,再取1.73 g结晶的硫酸铜溶解在10 ml水中,慢慢将此溶液加入上述溶液,用水稀释至100 ml得 benedict试剂。
(2)操作方法
用benedict试剂代替fehling试剂 重复以上实验,取4支试管,编号,分别加入benedict试剂
0.5ml。摇匀并置于水浴中微热后,分别加入5滴待测糖溶液,振荡后置于沸水浴中加 热2 ~ 3min,取出冷却,观察颜色变化及有无沉淀析出。
样品:葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖
解释: 硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产
生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。
(四) 成脎试验
(1)实验原理: 单糖与过量的苯肼作用生成糖脎,糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎,其晶形、熔点及生成速度大都不同,所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。由于成脎反应是发生在c1和c2上,不涉及糖分子的其他部分,所以葡萄塘、果糖都能生成相 同的脎。但由于成脎的速度不同,仍然是可以区别的。 (2)操作方法
在试管中加人1 ml 5%的样品溶液,再加入0.5 ml 10%的苯肼盐酸盐溶液和0.5 ml 15%的乙酸钠溶液,在沸水浴中加热并振摇,记录并比较形成结晶所需要的时间。并在低倍 显微镜下观察脎的结晶形状。
样品:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖
注意: 苯肼有较高毒性。取用时慎勿触及皮肤。若已发生皮肤沾染,先用稀醋酸洗,再 用清水洗净。
解释: 单糖与过量的苯肼作用生成糖脎,糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎,其晶形、熔点及生成速度大都不同,所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。
(五)tollens试验
在洗净的试管中加入1 ml tollens 试剂, 在加入0.5 ml 5%糖溶液,在50 oc 水浴中温
热,观察有无银镜生成。
样品:葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖
解释: (六)淀粉水解试验
(1)实验原理: 淀粉是葡萄糖的高聚体,在餐饮业又称芡粉,通式是
(c6h10o5)n。淀粉在酸的催化作用下,能发生水解;淀粉的水解过程:先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物),糊精继续水解生成麦芽糖(双糖),最终水解产物是葡萄糖(单糖),其与fehling
试剂作用可发生显色反应。
(2)操作方法: 在试管中加入3 ml淀粉溶液, 再加入0.5 ml 20%稀硫酸,将试管放在沸水中加热5 min,然后取出试管冷却后用10%naoh溶液中和至中性。取2滴与fehling试剂 作用,观察有何现象发生?
现象:产生砖红色沉淀
解释:淀粉是葡萄糖的高聚体,淀粉在酸的催化作用下,能发生水解;淀粉的水解过程:先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物),糊精继续水解生成麦芽糖(双糖),最终水解产物是葡萄糖(单糖),其与fehling试剂作用可发生显色反应。
二、氨基酸及蛋白质的鉴定
氨基酸:含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称,是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。
蛋白质:是由氨基酸以酰胺键形成的复杂高分子化合物,是生物体的基本组成物质。 实验目的:
(1)了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。
(2)掌握蛋白质和某些氨基酸的显色反应原理。
(3)学习几种常用鉴定蛋白质和氨基酸的方法。
(一)茚三酮反应
(1)实验原理
-氨基酸或含有游离氨基的蛋白质的水解产物与茚三酮水溶液共热,能生成蓝紫色化合物。这是-氨基酸特有的反应,因此常用于-氨基酸的定性或定量测定。
(2)操作方法
取3支试管,编号后分别加入4滴0.5%的甘氨酸、酪蛋白和蛋白质 溶液,再加入2滴0.1%的茚三酮-乙醇溶液,混合均匀后,将试管放在沸水浴中加热1~2min,观察并
比较3支试管显色的先后次序。
样品:甘氨酸、酪蛋白和蛋白质
解释:
(二)双缩脲反应
(1)实验原理:尿素加热至180℃左右,生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性 环境中能与cu2+结合生成紫红色化合物,此反应称为双缩脲反应。
由于蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,因此也能发生此反应生成蓝色、紫色或红色的铜盐配合物。氨基酸因不含肽键,故除组氨酸外都不发生此反应。
nh2
—
co
—nh—co—nh2
(双缩脲)
(2)操作方法:取1支试管,加入10滴蛋白质溶液和15-20滴10%naoh溶液,混合均 匀后,再加入3-5滴5%硫酸铜溶液,边加边摇,观察有何现象。
现象:变成蓝色溶液
解释:尿素加热至180℃左右,生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与 cu2+结合生成紫红色化合物,此反应称为双缩脲反应。
由于蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,因此也能发生此反应生成蓝色、 紫色或红色的铜盐配合物。
(三)黄色反应
(1)实验原理:几乎所有的蛋白质与浓硝酸作用产生黄色,黄色物质在碱性溶液中进一步形成橙红色。这是因为多数蛋白质分子都含有带苯环的氨基酸,产生黄色的硝化物。
(2)操作方法:
(a) 取一支试管,加4滴蛋白质溶液和2滴浓硝酸(由于强酸作用,蛋白质出现白色沉淀),然后置于水浴中加热,沉淀变成黄色,冷却后,逐滴加入10%naoh溶液至溶液呈 碱性,观察颜色的变化。
(b)取一支试管,加4滴0.1%苯酚溶液代替蛋白质,重复上述操作,观察颜色的变化。 (c)取一支试管,加入少量指甲,再加入5-10滴浓硝酸,放置10min后,观察指甲的 颜色变化。
(四)醋酸铅反应
操作方法
取一支试管, 加1 ml 0.5%醋酸铅溶液,再逐滴加入1%naoh溶液,直到生成的沉淀溶解为止,摇动均匀。再加入5-10滴蛋白质溶液,混合均匀,在水浴上小心加热,待溶液变成棕黑色时,将试管取出冷却,再小心加入2 ml浓盐酸。观察有何现象产生,并
嗅其味,判断是什么物质。
现象:产生大量白色,具有刺激性气味的气体 。该气体是硫化氢气体
解释:蛋白质分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸,含硫蛋白质在强碱条件下,可分解形成硫化钠。硫化钠和醋酸铅反应生成黑色的硫化铅沉淀。若加入浓盐酸,就生成有臭味的硫化氢气体。r-sh+2naoh → r-oh+nas+ho 22
na2s+pb+2 →
pbs↓ +2na+ pbs +2hcl→ pbcl+hs↑ 22
相关文章
医护人员辞职报告集合11篇2023-07-12 19:55:12
专职辅导员转专职教师申请报告2023-07-18 17:00:36
医院审计报告2023-07-12 16:53:43
关于饮用水的调查报告范文2023-07-18 17:40:26
医生的辞职报告(精选十五篇)2023-07-06 19:00:35
销售述职报告范文三篇2023-07-20 20:58:37
上海对外经贸大学和北京交通大学(威海校区)对比哪个好(排名分数线区2024-05-05 08:38:37
河北高考排名237950名物理能上什么大学(能报哪些学校)2024-05-05 08:32:42
山东城市建设职业学院在山东招生人数和招生计划 多少人2024-05-05 08:28:35
上海农林职业技术学院在湖南招生人数和招生计划 多少人2024-05-05 08:26:11
吉林农业科技学院在湖南招生人数和招生计划 多少人2024-05-05 08:22:38
安徽高考多少分可以上云南经贸外事职业学院 招生人数和最低分2024-05-05 08:18:11
关于大学生课外阅读的调查报告2023-07-06 14:46:48
工程技术部述职报告2023-07-19 13:39:50
在幼儿园的暑假工作实践报告范文2023-07-22 16:37:13